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084			_aUDA-BG T21248
100	1		_aPulgarín Alvarado, Gabriela, _eautor
245	1	0	_aProducción heteróloga y caracterización de una Lacasa microbiana
264	3	1	_aEcuador : _bUniversidad del Azuay-Facultad de Ciencia y Tecnología-Escuela de Biología, _c2025
300			_a29 páginas
300			_bDigital
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338			_2rdacarrier _arecurso en línea _bcr
502			_aBiólogo
520	3		_bEl presente estudio se centró en la producción, purificación y caracterización de una lacasa recombinante de Bacillus coagulans expresada en Escherichia coli C41. Se evaluaron distintas fuentes y concentraciones de cobre, así como diferentes concentraciones de IPTG, identificándose que la combinación de 1 mM de IPTG y 0,25 mM de CuCl2 bajo agitación generó las mayores actividades enzimáticas en las condiciones ensayadas. La proteína recombinante fue purificada mediante cromatografía de afinidad con etiqueta de histidina utilizando el sistema ÄKTA pure, obteniéndose una proteína de aproximadamente 65 kDa con alta pureza. La caracterización enzimática reveló, utilizando 2,6-DMP como sustrato, un perfil bimodal de actividad en función del pH, con máximos a pH 7 en buffer citrato/fosfato y a pH 9 en buffer fosfato de sodio. La temperatura óptima fue de 40 °C en ambos casos, con una actividad significativamente mayor que la observada a 20 °C y 30 °C. Por otro lado, el pH 5 mostró la menor actividad entre todas las condiciones evaluadas. Estos resultados destacan el potencial de esta la casa recombinante para aplicaciones biotecnológicas, especialmente en la degradación de contaminantes fenólicos persistentes en ambientes acuáticos.
650	1	4	_aBIORREMEDIACIÓN
650	1	4	_aCARACTERIZACIÓN ENZIMÁTICA
650	1	4	_aEXPRESIÓN HETERÓLOGA
650	1	4	_aLACASA BACTERIANA
650	1	4	_aPURIFICACIÓN ENZIMÁTICA
700	1		_aCaroca Cáceres, Rodrigo Sebastián, _edirector de Tesis
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